Skip to content

Wiązanie, wychwyt i wewnątrzkomórkowy transport modyfikowanych fosforotionianem oligodezoksynukleotydów.

2 miesiące ago

162 words

Zwiększone zrozumienie mechanizmów wychwytu i wewnątrzkomórkowego przemytu modyfikowanych fosforotionianem oligodezoksynukleotydów (P-ODN) może ułatwić zastosowanie tych związków do celów eksperymentalnych i terapeutycznych. Rozwiązaliśmy te problemy, identyfikując białka powierzchniowe komórek, z którymi P-ODN reaguje specyficznie, badając mechanizmy internalizacji P-ODN i śledząc internalizowany P-ODN przez komórkę, stosując techniki immunochemiczne i ultrastrukturalne. Badania chemicznego sieciowania z P-ODN znakowanym biotyną (bP-ODN) ujawniły istnienie pięciu głównych grup białek wiążących P-ODN na powierzchni w zakresie od około 20-143 kD. Wiązanie z tymi białkami było konkurencyjnie hamowane nieznakowanym P-ODN, ale nie wolną biotyną, co sugeruje specyficzność interakcji. Dodatkowe eksperymenty sugerowały, że białka wiążące prawdopodobnie istnieją jako struktury jednołańcuchowe, a reszty węglowodanowe mogą odgrywać rolę w wiązaniu P-ODN. Badania wychwytu z P-ODN znakowanym 35S ujawniły, że endocytoza, w której pośredniczy mechanizm receptorowy, dominowała przy stężeniach P-ODN <1 mikroM, podczas gdy endocytoza w fazie ciekłej przeważała przy wyższych stężeniach. Frakcjonowanie komórek i analiza ultrastrukturalna wykazały obecność ODN w jamach pokrytych klatryną oraz w strukturach pęcherzykowych zgodnych z endosomami i lizosomami. Oznakowane ODN znaleziono również w znaczących ilościach w jądrze, natomiast żaden nie był związany z rybosomami lub rybosomami związanymi z szorstką retikulum endoplazmatyczną (ER). Ponieważ wychwyt nuklearny nie był blokowany przez aglutyninę z kiełków pszenicy lub konkanawalinę A, sugerowany jest proces importu oparty na dyfuzji, niezależny od nukleoporyny. Dane te sugerują, że antysensowny DNA może wywierać działanie w jądrze. Sugerują również racjonalne sposoby projektowania ODN, które mogą zwiększyć ich efektywność. Wizerunki [więcej w: mazowiecki szpital onkologiczny wieliszew, jak poznawać nowych ludzi, sanatorium włókniarz busko zdrój turnusy rehabilitacyjne ] [więcej w: vedimasan opinie, eziclen cena, dobenox forte cena ]